CEM公司是世界领先的分析和合成化学应用微波仪器供应商。最近，我们一直致力于使用称为Liberty Blue™ 自动微波肽合成仪的仪器合成修饰的和药学上相关的肽。该仪器有多种合成应用可用于包括肽环化，肽模拟合成和肽修饰。

Liberty Blue可以使用哪种肽环化方法?

让我从RCM和碳氢化合物装订开始，这是一种环化形式，它连接两个氨基酸结构单元的侧链。Stapling稳定α-螺旋，并已显示增加蛋白酶抗性和细胞渗透性。

二硫键桥接是一种氧化键形成，发生在许多生物活性肽中，最常见的是毒液和治疗剂。二硫键稳定二级结构，并且与装订类似，可以增加蛋白酶抗性和靶亲和力。这些桥可以合成形成。

您还可以在硫醇之间形成键，以创建具有多个二硫键的肽。也可以进行头尾环化和侧链 - 链侧链缩合。

Liberty Blue可以使用哪些肽模拟合成方法?

的自由蓝色也可以用于拟肽合成，特别是，拟肽和拟肽-肽混合合成。

拟肽是具有聚-N-取代的甘氨酸的聚合物。由于它们的酰胺键被完全取代，它们对蛋白水解降解具有抗性。这使它们成为药物开发的有吸引力的目标。

此外，由于缺乏酰胺氢，拟肽的二级结构发生了改变。掺入拟肽单体并不像用Fmoc和取代的甘氨酸衍生物进行链增长那么简单。相反，两步乙酰化 - 亲核置换方法 - 是必要的。

首先，将溴乙酸偶联到肽或类肽单体的末端。然后，加入伯胺取代溴离子，得到最终的取代甘氨酸残基。此时，拟肽已准备好进一步延伸通道，无需去除Fmoc。

虽然这个两步程序并不像一步法合并过程那么简单，但它提供了很大的灵活性。有数千种可商购的方法可用于拟肽合成，为化学发现开辟了许多机会。

除了拟肽合成之外，Liberty Blue可能的另一种肽模拟应用是PNA单体掺入。

请描述使用Liberty Blue可实现的肽修饰?

N-末端乙酰化是在真核生物和原核生物中天然发现的广泛修饰，其中肽的电荷和疏水性被改变，影响其折叠性质和靶亲和力。N-末端乙酰化也可以增加蛋白酶抗性。自动化N-末端乙酰化快速而简单。

加入非标准受阻氨基酸如含有Aib或氮取代的N-甲基丙氨酸的季中心是另一个可以进行的重要过程。加入这些类型的衍生物正变得越来越流行。AIB诱导α螺旋形成，并且与拟肽单体一样，N-甲基丙氨酸增加蛋白酶抗性并改变二级结构。

结合这些构建块很简单。添加这些受阻氨基酸之一需要标准的单偶联。如果两个受阻氨基酸彼此连接，则需要延长的双偶联。将天然氨基酸连接到更受阻碍的残基上需要标准的双偶联。

我们还可以加入磷酸氨基酸。磷酸化将磷酸基团引入肽的酪氨酸，苏氨酸或丝氨酸残基上。酶促磷酸化调节许多肽和蛋白质的功能。合成磷酸化肽的能力可用于肽功能和信号转导的研究。

该磷酸化过程具有优于其他方法的优点。传统上，磷酸化肽的产生需要合成未修饰的线性序列，然后是合成后的磷酸化步骤。该步骤难以进行并且经常产生不纯的肽。Fmoc衍生的单苄基保护的磷酸氨基酸的引入显着改善了合成过程。

使用Liberty Blue和我们的标准耦合程序可以轻松地合并衍生物。然而，磷酸丝氨酸需要室温去保护，因为在去保护期间它似乎在高温下易于去磷酸化。加入其邻近的氨基酸后，我们可以恢复使用升高的脱保护温度。

请问您能描述对称的多肽分支吗?

对称支化的肽通常具有非常理想的生理化学和生物学性质，主要是由于它们的多价结合能力和改善的蛋白酶抗性。

例如，如果要合成具有相同氨基酸序列的四个独立链的肽，则必须回顾分支何时首次发生。用去保护溶液处理可以提供两种可用于链延长的游离胺。

该过程不需要专门的循环或方法，并且可以采用所有标准的单偶联方法。也可以比这种分支水平更进一步。

这些结果令人震惊，因为通过SPPS合成支链肽通常具有挑战性，因为细长肽链固有的紧密接近。微波能量的应用有助于克服空间碰撞和耦合效率差的挑战。

请问您能描述一下赖氨酸的功能化吗?

Liberty Blue的另一个应用是自动正交赖氨酸去保护和功能化。肽侧链功能化如生物共轭，标记和分支是有影响力和必不可少的合成工具。许多氨基酸可以被功能化，但赖氨酸已经受到特别关注。

类似于需要正交保护的Cys残基的二硫键形成，赖氨酸官能化还需要保护可被除去的基团，而不影响其余的肽。

三种最常见的衍生物可能是Lys(Mmt)，Lys(ivDde)和Lys(Alloc)。当Mmt在弱酸性条件下经历脱保护时，Lys(Alloc)需要钯催化剂并且ivDde需要稀释肼。

让我们考虑不对称肽支化作为赖氨酸功能化的延伸。LF Kymera肽具有两个不同的链延伸点;一个是原始肽链，另一个是赖氨酸侧链的延伸。这告诉您，您首先需要合成线性链，然后去保护赖氨酸并进一步延长。

Lys(ivDde)往往是选择的正交衍生物，因此您需要在原始链的最后位置使用Boc保护的苯丙氨酸构建块。用这种受Boc保护的氨基酸封端后，您可以将Lys(ivDde)脱保护并构建从此点延伸的序列。

与对称支化肽合成相似，您还可以进一步采取不对称支化。

是否可以使用Liberty Blue进行任何进一步的肽修饰?

还存在与Liberty Blue相容的其他肽修饰，包括结合糖胺氨基酸和正交谷氨酸脱保护和官能化。