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转座子编码的CRISPR-Cas系统指导RNA引导的DNA整合

2019-06-13 08:34:46 • 来源：

常规CRISPR-Cas系统通过利用指导RNA来抑制移动遗传元件(包括质粒和病毒)的核酸酶依赖性降解来维持基因组完整性。在这里，我们描述了这种范例的显着倒置，其中细菌Tn7样转座子已经选择核酸酶缺陷的CRISPR-Cas系统来催化RNA引导的移动遗传元件整合到基因组中。

可编程转座霍乱弧菌Tn6677在大肠杆菌中需要CRISPR-和转座子相关的分子机器，包括Cascade和转座蛋白TniQ之间的新型共复合物。供体DNA整合发生在靶DNA序列下游固定距离处的两种可能取向之一，并且可以适应可变长度的遗传有效载荷。

深度测序实验揭示了跨数十个独特靶位点的高度特异性，全基因组DNA整合。这项工作提供了完全可编程的RNA引导整合酶的第一个例子，为基因组操作奠定了基础，消除了双链断裂和同源定向修复的要求。

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